Индекс
издания
76063

ISSN 2303-9949

КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY

Автор: Р.В. Безруков, В.В. Ладыгина
Место работы: Центр ЭКО, г. Алматы

Введение. Последние исследования свидетельствуют о высокой частоте распространения генетических аномалий у мужчин с нарушенным сперматогенезом. В общей популяции уровень хромосомных аномалий невелик и составляет 0,5-3,0%. Среди пациентов с нарушением фертильности доля лиц с хромосомными аномалиями возрастает до 7-10%. Распространенность хромосомных нарушений среди мужчин с необструктивной азооспермией достигает 20%. Мужчины с кариотипом 45Х/46ХY составляют примерно 5% от общего количества больных с моносомией гоносом. (10). Такая форма синдрома характеризуется широким диапазоном клинических проявлений в зависимости от соотношения клеточных клонов – от типичного синдрома Шерешевского-Тернера – до нормального мужского фенотипа (9)
В данной теме мы описываем редкие клинические случаи мозаичного изменения кариотипа у пациентов с азооспермией и первичным бесплодием.
Цель исследования. Обозначить важность цитогенетического исследования при тяжелых формах мужского бесплодия (олигоастенотератозооспермия, азооспермия). Привлечь внимание врачей смежных с репродуктологами специальностей к данной проблеме.
Материалы и методы. При цитогенетическом исследовании использовались стандартные методики 72-часового культивирования лимфоцитов. Все этапы работы проводились с использованием реактивов фирмы «Gibco». Подготовка, фиксация и дифференциальное (GTG) окрашивание хромосом проводи по методике, рекомендованной специалистами Kaplan Medical Center (Израиль). При метафазном анализе учитывали не менее 20 клеток. Исследования проводилось на микроскопе OLYMPUS BX 61 с программным обеспечением Applied Imaging. При выявлении мозаицизма, результат цитогенетического исследования был подтвержден методом флюоресцентной гибридизации in situ с использованием зондов фирмы Vysis. Подготовка и фиксация лимфотических ядер проводилась по методике, рекомендованной специалистами Kaplan Medical Center (Израиль). Исследования проводилось по трем хромосомам – 18,Х,Y. При анализе учитывались как интервазные, так и метафазные ядра. Количество проанализированных ядер не менее 100 . Гибридизацию in situ проводили в соответствии с протоколом, рекомендованным фирмой-производителем.

Случай 1.
Мужчина 32 лет, обратился в центр ЭКО по поводу первичного бесплодия в течение 10 лет. Впервые сдавал спермограмму в 1999 году, где выявлена азооспермия, проблемой не занимался. Половая функция не нарушена. Выполнен анализ эякулята. Консультация андролога.
Результаты обследования: рост пациента 165 см, вес 79 кг, телосложение евнуховидное, оволосение лобка по женскому типу. Половой член развит правильно, без патологических изменений. Яички пальпируются в мошонке, значительно уменьшены в размерах, придатки не изменены. На ультразвуковом исследовании – гипоплазия яичек, суммарный объем 4,9 мл. Гормоны крови: умеренное увеличение ФСГ (15,9 МЕ\л) и ЛГ (11,8 МЕ\л), тестостерон по нижней границе нормы 12,0 нМ\л (норма 12-38 нМ\л). В анализах эякулята азооспермия. Проведена цитогенетическая диагностика, при которой выявлен мозаичный кариотип с тремя клонами клеток: 45,X[20%]/46,XY,del(Y) [18%]/46,XY [62%].
Результаты кариотипирования были подтверждены молекулярно-цитогенетическими методами с применением флюоресцентной гибридизации in situ.
Результат:45,XishXp11.1-q11.1(DXZ1x1)Yp11.1(DYZ3x0)[35]/ 46XYishXp11.1-q11.1(DXZ1x1) Yp11.1-q11.1(DYZ3x1) [65]. На рисунках 1-6 представлены результаты кариотипирования с указанием всех клонов клеток, а также результаты FISH-диагностики ядер лимфоцитов.

КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY
Рис. 1
КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY
Рис. 2
КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY
Рис. 3
КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY
Рис. 4
КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY
Рис. 5
КЛИНИЧЕСКИЕ СЛУЧАИ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ ПРИ МОЗАИЧНОМ КАРИОТИПЕ 45 Х/46 ХY
Рис. 6

Случай 2.
Мужчина 26 лет, обратился в нашу клинику на консультацию андролога по поводу бесплодия в браке на протяжении 3 лет. Половая функция не нарушена. Выполнен анализ эякулята дважды согласно рекомендациям ВОЗ.
Результаты обследования: рост пациента 161 см, вес 59 кг, оволосение по мужскому типу, мошонка подтянутая, пигментированная. Половой член нормально развит. Яички пальпируются в мошонке, несколько уменьшены в размерах. Ультразвуковое исследование яичек определило гипоплазию, суммарный объем составил 8,5 мл. Гормоны крови: ФСГ, ЛГ, Тестостерон – в пределах нормы (ФСГ дважды: 6,3 и 9,8 при норме 1-14 МЕ/л). В анализах эякулята выявлена азооспермия.
При цитогенетическом исследовании выявлен мозаичный кариотип с моносомией по гоносомам в патологичном клоне: 45,X(92%)/46,XY(8%). Результаты кариотипирования были подтверждены молекулярно-цитогенетическим методом с применением флюоресцентной гибридизации in situ.
Результат: 45,X ish X p11.1-q11.1(DXZ1x1) Yp11.1(DYZ3x0) [119]/ 46XY ish X p11.1-q11.1(DXZ1x1) Yp11.1-q11.1(DYZ3x1) [11]. По настоянию пациента выполнена пункционная биопсия обеих яичек и придатков: сперматозоиды не обнаружены (Сертоли клеточный синдром).

Случай 3.
Мужчина 39 лет, обратился в центр ЭКО по поводу бесплодного брака на протяжении 3 лет, бесплодие первичное. Половая функция не нарушена. Ранее у андролога не обследовался. Выполнен анализ эякулята (дважды).
Результаты обследования: рост 159 см, вес 54 кг, телосложение нормостеническое, оволосение лобка по мужскому типу. Половой член развит правильно, без патологических изменений. Яички пальпируются в мошонке, значительно уменьшены в размерах, придатки не изменены. На ультразвуковом исследовании – гипоплазия яичек, суммарный объем 3,4 мл. Гормоны крови: увеличение ФСГ – 17,7 МЕ\л, снижение тестостерона – 5,4 нМ\л. В анализах эякулята – азооспермия.
При цитогенетическом исследовании выявлен мозаичный кариотип с моносомией по гоносомам и делецией Y хромосомы: 45,X[77%]/46,X,delY[23%]. Результаты кариотипирования были подтверждены молекулярно-цитогенетическими методами с применением флюоресцентной гибридизации in situ.
Результат: 45,X ish X p11.1-q11.1(DXZ1x1) Yp11.1(DYZ3x0) [115]/ 46XY ish X p11.1-q11.1(DXZ1x1) Yp11.1-q11.1(DYZ3x1) [35]
Заключение. Мозаичный кариотип 45,Х/46,ХY является редкой причиной мужского бесплодия. Наряду с широким диапазоном клинических проявлений данной патологии, характерной особенностью является низкий рост. Во всех описанных нами случаях рост пациентов значительно ниже роста близких родственников (родители, сестры, братья). Данная особенность связана с замедлением роста, а не всплеском, в период полового созревания (Tosson H, Rose SR, Gartner LA. 2010). В то же время, клиническая картина этого синдрома не позволяет провести дифференциальный диагноз с другими типами азооспермий. Можно предположить, что триада: азооспермия, гипоплазия яичек и низкий рост – являются наиболее частыми проявлениями при описанных выше кариотипах. В литературе встречаются единичные сообщения об обнаружении тестикулярных сперматозоидов, полученных в результате биопсии придатков и яичек, и выполнении программы ICSI у таких пациентов. (Kilic S, Yukse B 2010 ). Решение о проведении данной процедуры должно решаться индивидуально в каждом случае, с учетом всех прогностических факторов.
Следует отметить, что в тех случаях, когда выявляется мозаичный кариотип, клинически значимо соотношение нормального и патологичного клона. Цитогенетическое исследование, в силу трудоемкости анализа и ограниченного числа исследуемых клеток, не всегда может отражать истинную картину процента нормального клона. В целях подтверждения результатов кариотипирования во всех описанных случаях нами была проведена молекулярно-цитогенетическая диагностика ядер лимфоцитов методом FISH. Данный метод позволил ускорить процесс исследования за счет анализа интерфазных клеток. Полученные результаты различных авторов (5, 6), доказали необходимость применения молекулярно-цитогенетического исследования для установления истинного мозаицизма и уточнения соотношения клонов клеток с нормальным и аномальным содержанием хромосомы Х или Y, что имеет существенное значение для проведения медико-генетического консультирования и разработки дальнейшей тактики ведения пациентов с проблемами репродукции. Необходимо отметить, что цитогенетическая диагностика пациентов с тяжелыми формами мужского бесплодия на начальном этапе обследования, позволит поставить этиологически корректный диагноз, и избежать длительных и, зачастую, дорогостоящих эмпирически назначаемых лечений. Отдельной темой является вопрос об исследовании кариотипов низкорослых подростков в период полового созревания, так как своевременная гормональная терапия может скорректировать данную проблему.

ЛИТЕРАТУРА
1. Андрология. Мужское здоровье и дисфункция репродуктивной системы: Пер. с англ./Под ред. Э.Нишлага, Г.М.Бере. – ООО «МИА», 2005. – 554с. 2. Tosson H, Rose SR, Gartner LA. Pediatric Endocrinology Clinic, Morgantown, W. Va., USA. Horm Res Paediatr. 2010;74(3):190-200. Epub 2010 Apr 30. 3. Kilic S, Yukse B, Tasdemir N, Dogan M, Ozdemir E, Yesilyurt A, Keskin I. Reproductive Endocrinology Department, Dr Zekai Tahir Burak Women’s Health and Research Hospital, Ankara, Turkey. Taiwan J Obstet Gynecol. 2010 Jun;49(2):199-202 4. Andrade JG, Guerra-Júnior G, Maciel-Guerra AT. Universidade Estadual de Campinas, SP, Brasil. Arq Bras Endocrinol Metabol. 2010 Mar;54(3):331-4.
5. Савельева А.П. Структура хромосомной патологии среди пациентов с мужским бесплодием и патозооспермией. Автореф. дис. … канд. биол. наук. М., 2002.
6. Шаронин В.О. Роль молекулярно — цитогенетических исследований хромосомных аномалий соматических и половых клеток при нарушении репродуктивной системы у пациентов мужского пола. Автореф. дис. … канд. биол. наук. М., 1998.
7. Ворсанова С.Г., Юров Ю.Б., Чернышов В.Н. Хромосомные синдромы и аномалии. Классификация и номенклатура. Ростов-на-Дону 1999; 191.21.
8. Morel F., Gallon F., Amice V. et al. Sex chromosome mosaicism in couples undergoing intracytoplasmic sperm injection. Hum Reprod 2002; 17.
9. Скрябин Н.А., Павлова Т.Д., Алексеева А.В., Ноговицына А.Н., Сухомясова А.Л. Сведения о пациентах с синдромами, связанными с патологией половых хромосом Полное название: Республиканский генетический регистр медико-генетической консультации РБ № 1 Национального центра медицины: сведения о пациентах с синдромами, связанными с патологией половых хромосом. 2007-2(18) – С. 48-52. 10. Таневский В.Э., Гоголевская И.К., Ширшова Л.С. Генетические факторы и особенности диагностики при мужском бесплодии.

Облако тегов

Андрология (3) История медицины (4) Лапароскопия (1) МЕТОД АБДОМИНАЛЬНОЙ ДЕКОМПРЕССИИ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ (1) Мифепристон (1) Мозаицизм (1) ПРОЛАПС ТАЗОВЫХ ОРГАНОВ (1) Перговерис (1) Преждевременная недостаточность яичников (1) Прогестины (1) Селективный модулятор рецепторов прогестерона (СМРП) (1) ЭКО (4) агонисты Гонадотропных Рилизинг Гормонов (аГнРГ) (1) бластоцисты хорошего качества (1) вспомогательные репродуктивные технологии (4) гетеротопическая маточная и шеечная беременность (1) гинекология (2) гистероскопия (1) донация ооцитов (1) заместительная гормональная терапия (1) имплантация (1) климактерические расстройства (1) климактерический период (1) клиническая беременность (2) контролированная стимуляция яичников (1) контролируемая стимуляция суперовуляции (1) культивирование эмбрионов (1) менопауза (1) менопаузальный гонадотропин человека (1) минерально – витаминный комплекс Эмфетал (1) миома (1) миома матки (1) обмен опытом (2) окклюзия подвздошных артерий (1) органосохраняющее оперативное лечение (1) перистальтика (1) подготовка эндометрия (1) постменопауза (1) пролапс гениталий (2) трансдермальный натуральный эстроген (1) фармакоэкономический анализ (1) фоликулостимулирующий гормон (1) фоноэнтерография (1) хромосомный мозаицизм (1) энтеро-энтеральный тормозной рефлекс (1)

Реклама