ГЛАВНАЯ ЖУРНАЛЫ СОБЫТИЯ ИЗДАНИЯ КОНГРЕСС О НАС КОНТАКТЫ  

УВЕЛИЧЕНИЕ АНЕУПЛОИДИЙ СПЕРМАТОЗОИДОВ ПРИ НЕУДАЧНЫХ ПРОГРАММАХ ЭКО И НЕВЫНАШИВАНИИ
 
Р.В. Безруков, В.В. Ладыгина

Центр ЭКО г. Алматы


Частота привычного невынашивания колеблется от 10 до 25% и в большей половине случаев, по мнению большинства исследователей, причиной являются хромосомные нарушения, несовместимые с развитием плода. Еще в 60-х годах прошлого века исследователи отмечали увеличение частоты хромосомных аберраций при спонтанных абортах на ранних сроках до 70% (Boue J.G. 1970,Carr D.H. 1965). В то же время, при медицинских абортах частота хромосомных аномалий около 2% (Hahnemann N. 1973). В виду специфических особенностей гаметогенеза, мужские половые клетки более доступны для исследования, чем женские. В настоящее время одним из немногих информативных анализов изменений набора хромосом в половых клетках является метод флуоресцентной гибридизации нуклеиновых кислот insitu (FISH). Большинство опубликованных статей отмечают увеличение анеуплоидий сперматозоидов в группах с патоспермией (D.Strassburger, 2007), при привычном невынашивании (G.Collodel, 2009), при неудачных программах ICSI (J.D.M. Nicopoullos, 2008), у пациентов с изменениями кариотипа (B.Baccetti, 2005).

Цель исследования: провести сравнительный анализ повышения анеуплоидий ядер сперматозоидов в парах с привычным невынашиванием и неудачных программах ЭКО относительно контрольной группы, и разработать алгоритм комплексного генетического обследования пациентов и профилактических мероприятий для конкретной супружеской пары.

Материалы и методы. Исследование проводилось в трех группах пациентов: I группа с привычным невынашиванием (2 и более случая) n=24; II группа неудачные программы ЭКО (2 попытки и более) n=18; III контрольная группа n=15 (штатные доноры спермы центра).

 

Таблица 1. Характеристики пациентов

uvelichenie-aneuplo-tabl1.jpg

Примечание. NS – различия недостоверны при p>0,05


Предварительный анализ эякулята во всех группах был вариант нормы (WHO 2010), в исследование не допускались пациенты с олигоастенотератозооспермией. Материалом для исследования служили ядра сперматозоидов. Подготовка и фиксация ядер проводилась по методике, рекомендованной специалистами KaplanMedicalCenter (Израиль). Исследования проводилось по трем хромосомам – 18,Х,Y.Для флюоресцентной гибридизации insitu использовали зонды фирмы Vysis. При анализе учитывались только сперматозоиды с интактной морфологией головки и хвоста. Допустимой суммарной нормой количества анеуплоидий при данной методике является 1,18%.

 

Результаты. Сравнительный анализ всех трех групп пациентов не выявил достоверных различий по возрасту и индексу массы тела. В I группе превышение допустимых значений количества анеуплоидий получено у 13 (54,2%) пациентов, в том числе значительное превышение (от 4 до 11,5%) у 5 мужчин. Во II группе превышение количества анеуплоидий отмечено в 7 (38,9%) случаях, значительное в 2 случаях (4,5% и 6,3%). В контрольной группе умеренное увеличение количества анеуплоидий до 1,9% зафиксировано в 1 случае (6,7%).

 

uvelichenie-aneuplo-ris1.jpg

Рисунок 1. Результаты исследования методом FISH спермы

 

Выводы. Полученные результаты показывают значительное увеличение случаев с превышением анеуплоидных сперматозоидов в обеих исследуемых группах относительно контрольной. Что свидетельствует о необходимости выполнения данного метода исследования, возможно даже в виде скрининга при бесплодии семейной пары. Данным пациентам должна рекомендоваться процедура предимплантационной диагностики, а при отсутствии нормальных эмбрионов на перенос, решаться вопрос об использовании донорской спермы. Нами разработан алгоритм ведения пар при неудачных программах ЭКО и привычном невынашивании с повышенным результатом уровня анеуплоидий на FISH диагностики ядер сперматозоидов

- уровень анеуплоидии от 1,5 до 2% - коррекция фолатного обмена

- уровень анеуплоидии от 2,1 до 4% - использование ИМСИ

- уровень анеуплоидии от 4,1 до 10% - проведение ВРТ с предимплантационной диагностикой

- уровень анеуплоидии более 10% - решение вопроса об использовании донорской спермы.

 

ЛИТЕРАТУРА 

1. J.D.M. Nicopoullos, C. Gilling-Smith, P.A. Almeida, S. Homa, L. Nice,H. Tempestand J.W.A. Ramsay. The role of sperm aneuploidy as a predictor of the successof intracytoplasmic sperm injection?  Human Reproduction Vol.23, No.2 pp. 240–250, 2008

2. B.Baccetti, G.Collodel, R.Marzella, E.Moretti, P.Piomboni, G.ScapigliatiandF.Serafini.Ultrastructural studies of spermatozoa from infertile maleswith Robertsonian translocations and 18, X, Y aneuploidies. Human Reproduction Vol.20, No.8 pp. 2295–2300, 2005

3. D.Strassburger, M.Reichart, S.Kaufman, E.Kasterstein, D.Komarovsky, O.Bern,

S.Friedler, M.Schachter, R.Ron-El and A.Raziel.

Morphology assessment and fluorescence in situ hybridization of the same spermatozoon using a computerized cell-scanning system. HumanReproductionVol.22, No.1 pp. 201–209, 2007

4. ГлинкинаЖ.И. Диагностика и профилактика врожденных и наследственных заболеваний при вспомогательных репродуктивных технологиях.Авторефератдиссертациинасоисканиеученойстепенидокторабиологическихнаук. – М., 2008.

5. ТихомировА.Л., ЛубнинД.М. Привычное невынашивание беременности (Методическое пособие для врачей акушеров-гинекологов) М. 2008. – С.44

6. Савельева А.П. Структура хромосомной патологии среди пациентов с мужским бесплодием и патозооспермией. Автореф. дис. ... канд. биол. наук. М., 2002.

7. Шаронин В.О. Роль молекулярно-цитогенетических исследований хромосомных аномалий соматических и половых клеток при нарушении репродуктивной системы у пациентов мужского пола. Автореф. дис...канд.биол.наук. - М.,1998.

8. Martin R. Chromosomal analysis of human spermatozoa.Preimplantat.Genet.: Proc. 1st Int. Symp.; Chicago,Sept.14—19,1990;N.-Y.;London1991;91—102

9. БрагинаЕ.Е.,АбдумаликовР.А. Электронно-микроскопическое исследование сперматозоидов как функциональный тест спермиологического обследования. - М.,2002.

10. A. ZiniLibman. SpermDNAdamage: clinicalsignificanceintheeraofassistedreproduction. Can. Med. Assoc. J., August 29, 2006; 175(5): 495 - 500





 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  .  
 

Copyright (C) Репродуктивная медицина. Научно-практический журнал
г. Алматы, Алмалинский район, ул. Байтурсынова 79.
Тел.: +7 (727) 250 00 11, skype: medmedia.kz, e-mail: info@medmedia.kz
   
 
Яндекс.Метрика