ГЛАВНАЯ ЖУРНАЛЫ СОБЫТИЯ ИЗДАНИЯ КОНГРЕСС О НАС КОНТАКТЫ  

ГИПЕРГОМОЦИСТЕИНЕМИЯ И ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ОБМЕНА В ГЕНЕЗЕ НЕРАЗВИВАЮЩЕЙСЯ БЕРЕМЕННОСТИ IТРИМЕСТРА
 

Н.М. Мамедалиева, А.Р.Аимбетова

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии

 

Среди многообразия причин невынашивания беременности немаловажное место занимает генетическая предрасположенность, так как носительство тех или иных аллелей определенных генов может видоизменять течение биохимических процессов в организме матери и способствовать формированию невынашивания беременности /1/.

В структуре невынашивания беременности, особенно ее ранних потерь, одно из главных мест занимает неразвивающаяся беременность (НБ), то есть внутриутробная гибель эмбриона, не сопровождающаяся его самопроизвольным изгнанием из полости матки, с задержкой плодного яйца на неопределенно долгое время (критерии ВОЗ, 1980г.). Удельный вес неразвивающейся беременности среди самопроизвольных выкидышей достигает 15%, а на ранних сроках до 45-80%. В прерываниях беременности на ранних сроках особого внимания заслуживают дефекты генов фолатного обмена.

Фолатный цикл представляет собой сложный каскадный процесс, контролируемый ферментами, которые в качестве коферментов имеют производные фолиевой кислоты. Ключевую роль в фолатном цикле играет фермент 5,10 – метилентетрагидрофолатредуктаза (MTHFR) /2/.

Наиболее частым ферментным дефектом, который связан с умеренным повышением уровня гомоцистеина, является мутация в гене, кодирующем MTHFR. В настоящее время описано 9 мутаций гена MTHFR, расположенного в локусе 1р36.3. Самой частой из них является замена С677Т (в белке MTHFR – замещение аланина на валин), которая проявляется термолабильностью и снижением активности фермента MTHFR на 60% /3/. Другим вариантом полиморфизма гена MTHFR является замена нуклеотида аденина на цитозин в позиции 1298. Это приводит к замене остатка глутамина на остаток аланина в регуляторном домене фермента, что сопровождается небольшим снижением активности. У лиц, гомозиготных по мутации А1298С, отмечается снижение активности MTHGR примерно до 35% от нормы.

Нами в целях определения клинико-диагностической значимости полиморфизмов С677Т и А1298С в гене MTHGR, А66G в гене MTRR, А2756G в гене MTRдля риска возникновения неразвивающейся беременности было проведено молекулярно-генетическое исследование у 207 пациенток казахской национальности, 102 из которых составили пациентки, имеющие неразвивающиеся беременности I триместра в анамнезе (основная группа) и 105 женщин с нормальной репродуктивной функцией (контрольная группа).

У пациенток проводили забор венозной крови в вакутейнеры с ЭДТА. ДНК выделяли на полуавтоматической станции выделения ДНК/РНК 6100 NucteicAcidPnepStation «ABIPRISM». Далее проводили аллельспецифичную ПЦР с ПДРФ для детекции полиморфизмов генов. ПЦР ставилась с использованием ПЦР-амплификатора фирмы Eppendorf.

Как видно из таблицы 1, в основной группе достоверно реже встречался благоприятный гомозиготный генотип (СС) - 26,5±4,4%, в то время как в контроле – 42,9±4,8% (χ2=6,12; р<0,05). Частота гомогот по Т аллелю (ТТ) в основной группе составила 29,4±4,5%, что намного превышало аналогичный показатель в контрольной группе - 4,8±2,1% (χ2= 22,4; р<0,05). Частота гетерозигот (СТ) в группах обследуемых достоверных отличий не имела.

В контрольной группе частота встречаемости благоприятного аллеля С гена MTHFR превалирует над частотой аллеля Т (69,0±3,2% и 31,0±3,2% соответственно). В группе пациенток, имеющих в анамнезе привычное невынашивание в виде неразвивающихся беременностей, частота неблагоприятного аллеля Т оказалась выше частоты встречаемости аллеля С (51,5±3,5% и 48,5±3,5% соответственно) (χ2=18,0; р<0,05).

Что касается полиморфизма А1298С: в основной группе достоверно реже встречался благоприятный генотип (АА) – 29,4±4,5%, тогда как в контроле – 47,6±4,9% (χ2=7,23; р=0,05). Частота гомозигот по С аллелю (СС) в основной группе составила 20,6±4,0%, что в 2 раза выше показателя в контрольной группе – 9,5±2,9% (χ2= 22,4; р<0,05). Частота гетерозигот (СТ) в группе пациенток с невынашиванием в анамнезе недостоверно превышало аналогичный показатель в популяционном контроле (50,0±5,0% и 42,9±4,8% соответственно).

В контрольной группе частота встречаемости благоприятного аллеля А гена MTHFR превалирует над частотой аллеля С более чем в 2 раза (69,0±3,2% и 31,0±3,2% соответственно). В группе пациенток с неразвивающимися беременностями в анамнезе частота неблагоприятного аллеля С оказалась сопоставимой с частотой встречаемости аллеля А (54,4±3,5% и 45,6±3,5% соответственно) (χ2=18,0; р<0,05).

 

gipergom-polimorf-tabl1.jpg

Таблица 1. Генотипы и аллели гена MTHFRпо полиморфизмам С677Т и А1298С, %


Частоты генотипов и аллелей по А66G полиморфизму гена MTRR у пациенток с неразвивающимися беременностями в анамнезе, а также у женщин с нормальной репродуктивной функцией, составивших контрольную группу, представлены в таблице 2.

 

gipergom-polimorf-tabl2.jpg

Таблица 2. Генотипы и аллели гена MTRR по полиморфизму A66G, %

 

Как представлено в таблице 2, в основной группе достоверно реже встречался благоприятный гомозиготный генотип (АА) – 46,1±4,9%, в то время как в контроле – 63,8±4,7 (χ2=6,57; р<0,05). Частота гомозигот по Gаллелю (GG) в основной группе составила 18,6±3,9%, что более чем в 3 раза выше аналогичного показателя у здоровых женщин - 5,7±2,3% (χ2=8,12; р<0,05). Частота гетерозигот (АG) в группах обследуемых достоверных отличий не имела.

В контрольной группе частота встречаемости благоприятного аллеля А гена MTRR превалирует над частотой аллеляG почти в 4 раза (79,0±2,8% и 21,0±2,8% соответственно). В группе женщин с неразвивающимися беременностями в анамнезе частота неблагоприятного аллеляG меньше частоты аллеля А всего в 2 раза (36,3±3,4% и 63,7±3,4% соответственно).

Частоты генотипов и аллелей по А2756G полиморфизму гена MTR у пациенток с неразвивающимися беременностями в анамнезе, а также у женщин с нормальной репродуктивной функцией, составивших контрольную группу, представлены в таблице 3.

 

gipergom-polimorf-tabl3.jpg

Таблица 3. Генотипы и аллели гена MTR по полиморфизму A2756G, %

 

Как представлено в таблице 3, в основной группе достоверно реже встречался благоприятный генотип (АА) – 35,3±4,7%, в то время как в контрольной – 65,7±4,6% (χ2=19,16; р<0,05). Частота гомозигот по Gаллелю (GG) в основной группе составила 16,7±3,7%, что выше аналогичного показателя в контрольной группе более чем в 3 раза – 4,8±2,1% (χ2=7,72; р<0,05). Частота гетерозигот (AG) в группе обследуемых по развитию неразвивающейся беременности - 48,0±4,9%, что достоверно превышало данный показатель в контроле - 29,5±4,5% (χ2=7,48; р<0,05).

В контрольной группе частота встречаемости благоприятного аллеля А гена MTR более чем в 4 раза превышает частоту аллеляG (80,5±2,7% и 19,5±2,7% соответственно). В группе пациенток с невынашиванием в анамнезе частота неблагоприятного аллеляG лишь незначительно ниже данного показателя в группе контроля (59,3±3,45 и 40,7±3,4% соответственно) (χ2=22,1; р<0,05). Полученные результаты свидетельствуют о возможном вкладе гена MTR в этиологию и патогенез прерывания беременности по типу неразвивающейся.

Анализ частоты носительства полиморфных вариантов гена MTHFR у женщин с неразвивающимися беременностями I триместра позволил определить коэффициент oddsratio (OR), рассчитанный как относительный риск развития неразвивающейся беременности при носительстве того или иного генотипа. При этом выявлено, что носительство гомозиготного варианта (ТТ) гена MTHFR С677Т увеличивает риск развития неразвивающейся беременности в I триместре в 8,3 раза, а от носительства гетерозиготного варианта (СТ) гена MTHFR С677Т риск неразвивающейся беременности не повышается. Наиболее неблагоприятный аллель Т повышает риск вышеуказанного осложнения беременности в 2,4 раза.

Носительство гомозиготного варианта (CC) гена MTHFR А1298С увеличивает риск прерывания беременности в I триместре по типу неразвивающейся в 2,5 раза, гетерозиготного варианта (АС) этого же гена в 1,3 раза. Наиболее неблагоприятная аллельС повышает риск неразвивающейся беременности в 2 раза. Носительство гомозиготного варианта (GG) гена MTRR А66G повышает риск развития неразвивающейся беременности в 3,8 раза, гетерозиготного варианта (АG) этого же гена в 1,2 раза. Неблагоприятная аллель G увеличивает риск неразвивающейся беременности в 2,2 раза.

Носительство гомозиготного варианта (АG) гена MTR А2756G повышает риск прерывания беременности по типу неразвивающейся в 4 раза, гетерозиготного же варианта (АG) в 2,2 раза. Неблагоприятная аллель G повышает риск изучаемого нами осложнения течения беременности в 2,8 раза.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о важном вкладе генов фолатного цикла в этиологию и риск развития неразвивающейся беременности. Известно, что гипергомоцистеинемия является фактором риска развития нарушений нормального развития беременности. При этом в метаболизме гомоцистеина важную роль играют ферменты фолатного обмена (MTHFR, MTR, MTRR). В связи с этим представляет интерес исследование у пациенток с НБ зависимости содержания уровня гомоцистеина (ГЦ) во взаимосвязи с различными полиморфными вариантами генов фолатного обмена.

Исследование уровня ГЦ в сыворотке крови у пациенток с НБ в анамнезе показало достоверное повышение его уровня в Iтриместре беременности по сравнению с контрольной группой (соответственно 18,25±1,76 и 10,4±0,8 мкмоль/л, p<0,05). Сравнительный анализ уровня гомоцистеина в зависимости от полиморфизма генов фолатного метаболизма показал, что у пациенток-носительниц одного полиморфизма концентрация ГЦ составила 9,4±0,4 мкмоль/л, наличие полиморфных аллелей в 2-х генах фолатного обмена привело к достоверному повышению уровня НЦ до 14,96±0,6 мкмоль/л (p<0,001). Носительство ассоциаций из 3-х полиморфизмов в генах фолатного обмена способствовало повышению уровня ГЦ до 16,9±0,9 мкмоль/л, а у пациенток-носительниц полиморфных аллелей во всех генах, отвечающих за фолатный обмен, уровень гомоцистеина составил 24,3±1,4 мкмоль/л (p<0,001).

Таким образом, наши исследования показывают, что наличие полиморфизмов в генах фолатного обмена приводят к усугублению гипергомоцистеинемии, что, несомненно, является одним из звеньев патогенеза неразвивающейся беременности I триместра.

 

ЛИТЕРАТУРА:

1. Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. М., Триада-Х, 2002.- С.304.

2. Фетисова И.Н., Добролюбов А.С., Липин М.А., Поляков А.В. Полиморфизм генов

фолатного обмена и болезни человека.//Вестник новых медицинских технологий.- 2007.- Т.Х.№1.

3.YvesAubard, NicoleDarodes, MurielCantaloube. Hyperhomocysteinemiaand

pregnancy – reviewofourpresentunderstandingandtherapeutic implication. //European Journal of Obstetrics gynecology and Reproductive Biology 93 (2000).- P. 157-165.

 





 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  .  
 

Copyright (C) Репродуктивная медицина. Научно-практический журнал
г. Алматы, Алмалинский район, ул. Байтурсынова 79.
Тел.: +7 (727) 250 00 11, skype: medmedia.kz, e-mail: info@medmedia.kz
   
 
Яндекс.Метрика