Клинический опыт показал, что использование среды, содержащей GM-CSF в протоколах культивирования эмбрионов, приводит к увеличению частоты наступления клинической беременности в старшей возрастной группе.
Clinical experience has shown that the use of the medium containing GM-CSF in the minutes of culturing embryos leads to an increase in the frequency of clinical pregnancy in the older age group.
Ключевые слова: вспомогательные репродуктивные технологии, культивирование эмбрионов, клиническая беременность.
Keywords: assisted reproductive technology, growth of embryo, clinical pregnancy.
Пациенты старшего репродуктивного возраста составляют самый тяжелый контингент для клиник ВРТ. Для преодоления бесплодия им требуется большее количество попыток ЭКО, чем у пациентов в более молодом возрасте. Естественная фертильность женщин с возрастом уменьшается. Так, при использовании вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), шанс рождения ребенка у женщин младше 35 лет составляет около 50%, в возрасте 35-37 лет до 35%, для возрастной группы 38-40 лет около 20%, старше 40 лет – менее 15%.
Число пациентов старшей возрастной группы, по данным разных авторов, находится в пределах 10-30%. По данным медицинского центра «Астана ЭКОЛАЙФ», в 2012 году этот показатель составил 25% (диаграмма 1). Повышение эффективности программ ВРТ у пациенток старшей возрастной группы на сегодняшний день является одним из актуальных вопросов для многих клиник, занимающихся ВРТ.
Цель исследования
Провести анализ программ ЭКО/ИКСИ у пациенток старшей возрастной группы с использованием среды для культивирования эмбрионов содержащей GM-CSF.
Материалы и методы
Проведен ретроспективный анализ 44 программ с использованием среды содержащей GM-CSF (Embryogen, Origio) для оплодотворения, культивирования и переноса эмбрионов. Культивирование эмбрионов проводилось в мультигазовых инкубаторах OASIS, при температуре 37СО, с содержанием азота 6%, кислорода – 5%.Для сравнения, методом случайного выбора, взята группа из такого же числа пациентов, возрастом старше 38 лет. Оплодотворение и культивирование в контрольной группе проводилось по схеме: IVF→ISM1→Blastasist, перенос –в среде UTM. Обработку спермы проводили
методом центрифугирования в градиенте плотности Suprasperm, с использованием среды Spermpreparation. Ооциты оплодотворяли через 2-3 часа после пункции, добавляя 50-100 тысяч подвижных сперматозоидов на ооцит, в случае проведения ЭКО. Через 18-20 часов после оплодотворения ооциты исследовали на наличие пронуклеусов (MontagendVanderVen, 2001).
Дальнейшую оценку дробления и качества эмбрионов проводили через 46-48 часов после оплодотворения на инвертированном микроскопе OlympusIX71 при увеличении S400. Эмбрионы классифицировались согласно числу бластомеров, равнозначности и сферичности бластомеров, наличию фрагментации (MAX – 7,0 баллов). Перенос эмбрионов проводили на 3 сутки культивирования.
Клинические беременности диагностировали через 3-4 недели после переноса по наличию плодного яйца в полости матки. Для сравнения групп использовались следующие критерии: процент оплодотворения, процент дробления, количество качественных эмбрионов, количество переносимых эмбрионов, процент наступления биохимической и клинической беременности, роды.
Процент оплодотворения в обеих группах находится в пределах 86,6-89,5%. Дробление в исследуемой группе составило 90,9%, в контрольной – 93,6%. Оценивая качество эмбрионов (3-й день культивирования), наблюдается значительная разница – в исследуемой группе эмбрионы хорошего качества составили 77,6%, в контрольной –48,8%. Среднее количество переносимых эмбрионов на одну пациентку одинаково в контрольной и исследуемой группе – 2,1. Положительный ХГЧ на 14 день после переноса эмбрионов в 1-й группе – 34% (15), во 2 группе – 27,2% (12). В итоге, в исследуемой группе получено 14 клинических беременностей (что составило 31,8%), 12 родов, в контрольной группе процент эффективности заметно ниже – 18,1% (8 беременностей) и 6 родов.
Выводы
Сравнение исследуемой и контрольной группы показало, что культивирование эмбрионов в среде с содержанием GM-CSF у пациенток старшей возрастной группы приводит к:
— увеличению количества эмбрионов хорошего качества на 3-й день развития;
— увеличению частоты наступления клинической беременности;
-снижению числа потерь беременности и как следствие, увеличение числа родов.
Необходима разработка и исследование различных модификаций протоколов культивирования с применением среды содержащей GM-CSF.
Литература:
Fertility and Sterility, Volume 99, Issue 6, Pages 1600-1609, E 2, May 2013
Maroulis G. B. Effectofagingon fertility and pregnancy // Seminars Reprod Endocrinol, 1991. р. 165
Coulam C. B., Roussev R. G. Increasing circulating T-cell activation markers are linked to subsequent implantation failure after transfer of in vitro fertilized embryos // AJRI. 2003. № 50. р. 340–345
Scarpellini F., Sbracia M. Use of granulocyte colony-stimulating factor for the treatment of unexplained recurrent miscarriage: a randomised controlled trial. Human Reproduction, 2009; 24:703–708
Отправить рукопись.jpg "Архив журнала")