ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ СУПРУЖЕСКИХ ПАР В ПРОГРАММЕ ЭКО

Бесплодный брак как в нашей стране, так и за рубежом считается одной из важнейших социальных и медицинских проблем. По данным ВОЗ частота бесплодного брака составляет 10-15% от общего числа супружеских пар и не имеет тенденции к снижению. Прогрессивным этапом лечения бесплодия явилось внедрение в клиническую практику вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), позволяющих реализовать функцию деторождения при различных заболеваниях, которые ранее считались абсолютно бесперспективными. Преодоление бесплодия с помощью ВРТ высветило важную проблему – получение здорового потомства. Возникновение патологических состояний репродуктивной системы часто обусловлено хромосомными аномалиями. Хромосомная патология в популяции составляет в среднем 1%, а среди пациентов с нарушениями репродуктивной функции частота хромосомных аномалий по данным разных исследователей достигает 20%. В связи с этим, большое значение имеет цитогенетическое обследование пациентов в программе ЭКО. За 2009-2010 гг. в медицинском центре репродукции человека «АстанаЭКОЛАЙФ» проведено цитогенетическое обследование 393 пациентов в программе ЭКО, из них 220 женщин и 173 мужчин.
Цитогенетическое исследование было проведено на препаратах метафазных хромосом, которые получали из лимфоцитов периферической крови, культивируемых в условиях in vitro, в соответствии со стандартной методикой. Анализ хромосомных препаратов проводился с помощью микроскопа Olympus BX61, оснащенного цифровой камерой и программой автоматического кариотипирования Cytovision 3.9. При проведении кариотипирования руководствовались правилами, рекомендованными для цитогенетических исследований в учреждениях медико-генетической службы.
Цитогенетические находки составили 16% (60 случаев) (диаграмма № 1). Структура хромосомных аномалий представлена в диаграмме № 2.
Диаграмма № 1 Диаграмма № 2

Частота носителей сбалансированных структурных перестроек хромосом значительна и составляет в среднем 1:400 в популяции (Carrera J.M., Di Renzo G.C., 1993). Частота супружеских пар, в которых один из партнеров является носителем сбалансированной хромосомной аберрации, составляет примерно 1:100-200 (Papp Z., 1990).
Сбалансированные структурные перестройки в наших исследованиях представлены реципрокными транслокациями 46,ХХ,t(8;15), 46,Ху,t(2;15), 46,Ху,t(10;12), 46,Ху,t(y;8) и робертсоновской транслокацией 45, ХХ,der(13;14), что составило 1,3%.
Синдром Клайнфельтера, встречаясь в мужской популяции с частотой 0,2%, оказывается наиболее частой формой мужского гипогонадизма, обусловленного нарушением числа половых хромосом. В нашем центре из числа обследованных мужчин в 3 наблюдениях был выявлен синдром Клайнфельтера (47, ХХу). Таким образом, частота численных аномалий половых хромосом составила 1,73%.
У одного пациента с азооспермией выявлен кариотип 46, ХХ при мужском фенотипе – синдром де ля Шапелля, который характеризуется изменением половых органов и отсутствием сперматогенеза.
Частота носителей сверхчисленных маркерных хромосом в популяции составляет 1:1000. Наличие маркерных хромосом увеличивает вероятность образования анеуплоидных гамет. В наших исследованиях маркерная хромосома была обнаружена у одного пациента (46,Ху,+mar), удельный вес этой патологии составил 0,25%, что значительно превышает общепопуляционную частоту.
У 4-х пациентов была выявлена перицентрическая инверсия гетерохроматина 9-й хромосомы 46,ХХ/46,Хy,9ph. Эта наиболее распространенная структурная сбалансированная хромосомная аберрация считается парафизиологическим вариантом нормального кариотипа. Однако, за последние 10 лет в литературе накопилось много сообщений относительно носителей перицентрической инверсии 9-й хромосомы, у которых выявляются различные нарушения репродуктивной функции. К ним относят повторяющиеся выкидыши в анамнезе, замершие беременности, рождения детей с МВПР, бесплодие.
Кроме того, высокий процент хромосомных изменений составил полиморфизм хромосом (12%). Так, увеличение гетерохроматиновых участков аутосом 1 и 16, спутников и спутничных нитей акроцентрических хромосом встречалось в 11,7% случаев.
У 4 мужчин отмечено значительное увеличение длинного плеча Y-хромосомы (46,Х,yqh+) и в 3 случаях уменьшение длинного плеча Y-хромосомы (46,Х,уqh-). Таким образом, у 4% обследованных мужчин обнаружено изменение гетерохроматиновых районов Y-хромосомы.
Обращает на себя внимание, что хромосомные аномалии в наших исследованиях у мужчин встречались в 2,3 раза чаще, чем у женщин.
ДИАГРАММА № 3 ДИАГРАММА № 4

Представленные результаты наглядно показывают значительный вклад хромосомных аномалий при нарушениях репродуктивной функции.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют об актуальности и целесообразности цитогенетического обследования супружеских пар в программе ЭКО. Установление генетических причин патологических состояний значительно меняет тактику ведения и принципы терапии таких пациентов, создаёт условия повышения эффективности лечения бесплодия методами ВРТ.

ЛИТЕРАТУРА

1. Цитогенетические методы / Кузнецова Т.В., Логинова Ю.А., Чиряева О.Г. [и др.] // Медицинские лабораторные технологии. Т.2./ Ред.А.И. Карпищенко – М.1999. С. 550-578.
2. Гоголевская И.К. Y-хромосома и мужское бесплодие / Гоголевская И.К. Гоголевский П. А. // Проблемы репродукции. – 1999г. — № 5. – С.15-20.
3. Ворсанова С.Г. Аномалии половых хромосом при нарушениях репродуктивной функции у мужчин / Ворсанова С.Г., Шаронин В.О., Курило Л.Ф. // Проблемы репродукции. -1998г. – Т.4, №2. – С.12-21.
4. Н.О.Беспалова. Генетика невынашивания беременности / Н.О.Беспалова. // Ж. акуш. жен.болезн. – Т. LVI. Вып. 1./ 2007г. – С. 81-95.
5. В.С. Баранов, Э.К. Айламазян Экологические и генетические причины нарушения репродуктивного здоровья и их профилактика / В.С. Баранов, Э.К. Айламазян // Ж. акуш. жен.болезн. – Т. LVI. Вып. 1./ 2007 г. – С. 3-10.
6. Генетика. Учебник для вузов / Под ред. акад. РАМН. В.И. Ивановой. – М.: ИКЦ «Академкнига», 2006 г.
7. Прокофьева-Бельговская А.А. Структивный факультативный гетерохроматин. В кн.: “Гетерохроматические районы хромосом”, Наука 1986; С. 52–54.